Syrefasthet - Acid-fastness

Mycobacterium tuberculosis (rødfarget) i vev (blått).

Syre-hurtighet er en fysisk egenskap for visse bakterielle og eukaryote celler, så vel som noen sub-cellulære strukturer, spesielt deres motstand mot avfarging av syrer under laboratoriefargingsprosedyrer. Når de er farget som en del av en prøve, kan disse organismene motstå syre- og/eller etanolbaserte avfargingsprosedyrer som er vanlige i mange fargeprotokoller, derav navnet syrefast .

Mekanismene for syrefasthet varierer etter art, selv om det mest kjente eksemplet er i slekten Mycobacterium , som inkluderer arten som er ansvarlig for tuberkulose og spedalskhet. Syrefastheten til Mycobacteria skyldes det høye mykolsyreinnholdet i celleveggene , som er ansvarlig for fargemønsteret for dårlig absorpsjon etterfulgt av høy retensjon. Noen bakterier kan også være delvis syrefaste, for eksempel Nocardia .

Sure raske organismer er vanskelige å karakterisere ved bruk av standard mikrobiologiske teknikker, selv om de kan farges ved hjelp av konsentrerte fargestoffer, spesielt når fargingsprosessen kombineres med varme. Noen, for eksempel Mycobacteria , kan beises med Gram -flekken , men de tar ikke krystallfiolett godt og fremstår dermed lys lilla, noe som fortsatt potensielt kan resultere i en feil gramnegativ identifisering.

Den vanligste fargeteknikken som brukes for å identifisere syrefaste bakterier, er Ziehl – ​​Neelsen-flekken , der de syrefaste artene er farget knallrøde og skiller seg tydelig ut mot en blå bakgrunn. En annen metode er Kinyoun -metoden , der bakteriene er farget knallrøde og skiller seg tydelig ut mot en grønn bakgrunn. Syrefast Mycobacteria kan også visualiseres ved fluorescensmikroskopi ved bruk av spesifikke fluorescerende fargestoffer ( for eksempel auramin-rhodamin-flekk ). Eggene til den parasittiske lungefluen Paragonimus westermani blir faktisk ødelagt av flekken, noe som kan hindre diagnosen hos pasienter som har TB-lignende symptomer.

Noen syrefaste fargingsteknikker

• Ziehl - Neelsen flekk (klassiske og modifiserte bleketyper)
• Kinyoun flekk
• For fargeblinde mennesker (eller i bakgrunner der det er vanskelig å oppdage røde bakterier), kan Victoriablå erstattes med carbol fuchsin og pikrinsyre kan brukes som motflekk i stedet for metylenblått , og resten av Kinyoun -teknikken kan brukes.
  • Ulike teknikker for bakteriesporefarging ved bruk av Kenyon, f.eks
    • Møllers metode
    • Dorners metode (syrealkoholfarger) uten Schaeffer – Fulton -modifikasjonen (avfarges med vann)
    • Vaskemiddelmetode, ved bruk av Tergitol 7, ikke-ioniske polyglykoleter- overflateaktive stoffer type NP-7
• Fite flekk
  • Fite-Faraco flekk
  • Wade Fite flekk
• Ellis og Zabrowarny flekk (ingen fenol/karbolsyre)
• Auramin-rhodamin flekk
• Auramin fenol flekk

Bemerkelsesverdige syrefaste strukturer

Svært få strukturer er syrefaste; Dette gjør farging for syrefasthet spesielt nyttig i diagnosen. Følgende er bemerkelsesverdige eksempler på strukturer som er syrefaste eller modifiserte syrefaste:

• Alle mykobakterier - M. tuberculosis , M. leprae , M. smegmatis og atypisk Mycobacterium
• Actinomycetes (spesielt noen aerobe) med mykolsyre i celleveggen (merk Streptomyces IKKE har); ikke å forveksle med Actinomyces , som er en ikke-syrefast slekt av actinomycete
  • Nocardia (svakt syrefast; motstår avfarging med svakere syrekonsentrasjoner)
  • Rhodococcus
  • Gordonia (en actinomycete)
  • Tsukamurella
  • Dietzia
• Leder av sperm
• Bakteriesporer, se Endospore
• Legionella micdadei
• Enkelte mobilinneslutninger f.eks
  • Cytoplasmatiske inkluderingslegemer sett i
    • Nevroner i lag 5 av cerebral cortex neuronal ceroid lipofuscinosis ( Batten sykdom ).
  • Nukleære inkluderingsorganer sett i
    • Blyforgiftning
    • Vismutforgiftning.
• Oocyster av noen coccidian parasitter i avføring, for eksempel:
  • Cryptosporidium parvum ,
  • Isospora belli
  • Cyclospora cayetanensis .
• Noen andre parasitter:
  • Sarcocystis
  • Taenia saginata egg flekker godt, men Taenia solium egg gjør ikke (kan brukes til å skille)
  • Hydatidcyster , spesielt deres " kroker " flekker uregelmessig med ZN -flekk, men utstråler lys rød fluorescens under grønt lys, og kan hjelpe påvisning i moderat tung bakgrunn eller med knappe kroker.
• Soppgjærformer er inkonsekvent farget med syrefast flekk som regnes som en smalspektret flekk for sopp. I en studie om syrefasthet av sopp viste 60% av blastomyces og 47% av histoplasma positiv cytoplasmatisk farging av gjærlignende celler, og Cryptococcus eller candida ble ikke flekket, og svært sjelden flekker ble sett i Coccidioides endosporer.

Referanser

Eksempler på online protokoll

• Ziehl – ​​Neelsen -protokollen ( PDF -format).
• Alternativ Ellis & Zabrowarny-metode Arkivert 2006-01-04 på Wayback Machine for farging av AFB.