CFU-E - CFU-E
CFU-E står for Colony Forming Unit-Erythroid . Den stammer fra CFU-GEMM (via BFU-E, som står for "erythroid burst-forming units") og gir opphav til proerythroblaster .
Murine CFU-E-analyse
CFU-E er et stadium av erytroid utvikling mellom BFU-E scenen og pro-erythroblast scenen. CFU-E colony assay er designet for å oppdage hvor mange kolonidannende enheter av erytroide avstamning det er i et hematopoietisk vev (benmarg, milt eller fosterlever), som kan være reflekterende av organismenes behov for oksygenlevering til vevet eller en hematopoietisk lidelse.
Tidlige erytroidforfedre er funnet med en ganske lav frekvens i forhold til senere stadier av erytroid-differensiering, slik som pro-erytroblast og basofile erytroblast-stadier som kan oppdages ved flowcytometri direkte ex-vivo ( Socolovsky, M; Nam, H; Fleming MD; Haase, VH; Brugnara, C; Lodish, HF (desember 2001). "Ineffektiv erytropoiesis i Stat5a (- / -) 5b (- / -) mus på grunn av redusert overlevelse av tidlige erytroblaster" . Blod . 98 : 3261– 73. doi : 10.1182 / blood.v98.12.3261 . PMID 11719363 .). Videre, i motsetning til pro-erytroblast og senere stadier av erythroid-utvikling, eksisterer det ingen virkelig pålitelige og unike positive flowcytometriske markører, selv om det er mulig å bruke negative ekskluderingsmarkører for å tømme en cellepopulasjon av andre forløpere og differensierte celler ved cellesortering. , og beriket det dermed sterkt for CFU-E-aktiviteten (Prospective isolation and global gene expression expression of the erythrocyte colony-forming unit, Terszowski G. et al. Blood 2005). CFU-E-celler uttrykker Epo-reseptor, c-Kit (stamcellefaktorreseptor), transferrinreseptor (CD71 +), og er Ter119 (glykoforin-A-assosiert antigen) -negativ. Av ovennevnte årsaker er CFU-E-analysen, så ineffektiv og variabel som den ofte kan være, fortsatt i bruk i dag.
Celler på CFU-E-stadiet uttrykker noe erytropoietinreseptor (EpoR), og kan således induseres til å differensiere terminalt in vitro på 2-3 dager i nærvær av bare erytropoietin (Epo) (sammen med det grunnleggende innholdet i kulturmedier: FBS , BSA i IMDM). Metylcellulose er et halvfast medieadditiv som gjør det mulig for en etterforsker å flekke (med diaminobenzidinreagens for hemoglobin) og deretter telle individuelle kolonier, som hver kommer fra en enkelt belagt stamfar som er på CFU-E-stadiet. På dag 2 fra tidspunktet for utplatering vil hver CFU-E-koloni inneholde mellom 8 (minimum) og 64 hemoglobiniserte celler, hvorav de fleste er i sluttfasen av erytroid differensiering. Det er mulig å se et lite spektrum av hemoglobiniseringsnivå og muligens cellestørrelse, noe som indikerer at noen celler i kolonien har oppnådd sluttfasen raskere enn andre.
Celleantall i en koloni er viktig fordi pro-erytroblaststadiet også er epo-responsivt (uttrykker Epo-reseptor), men den proliferative kapasiteten til disse cellene er ikke så høy, og gir dermed en koloni med færre enn 8 celler. På samme måte kan et tidligere stadium av erytroid differensiering også gi kolonier i Epo-eneste medium, men disse koloniene vil sannsynligvis være mindre og / eller ikke hemoglobiniserte, siden trinnene før CFU-E-stadiet (MEP og BFU-E) krever andre faktorer (IL-3 osv.) Og mer tid for vekst som også vil forsinke terminaldifferensiering og hemoglobinisering.
Referanser
Eksterne linker
- CFU-E ved US National Library of Medicine Medical Subject Headings (MeSH)