Dobbelpolarisasjonsinterferometri - Dual-polarization interferometry

Dobbeltpolarisasjonsinterferometri ( DPI ) er en analytisk teknikk som sondrer molekylærlag adsorbert til overflaten av en bølgeleder ved hjelp av den svekkende bølgen til en laserstråle . Den brukes til å måle konformasjonsendringen i proteiner eller andre biomolekyler, mens de fungerer (referert til som konformasjonsaktivitetsforholdet ).

Instrumentering

DPI fokuserer laserlys i to bølgeledere. En av disse fungerer som den "sensing" bølgeleder som har en eksponert overflate mens den andre fungerer for å opprettholde en referansestråle. Et todimensjonalt interferensmønster dannes i det fjerne feltet ved å kombinere lyset som passerer gjennom de to bølgelederne. DPI-teknikken roterer polariseringen av laseren for å vekke vekslende to polarisasjonsmodi for bølgelederne. Måling av interferogrammet for begge polariseringene gjør at både brytningsindeksen og tykkelsen på det adsorberte laget kan beregnes. Polariseringen kan svitsjes hurtig, slik at sanntidsmålinger av kjemiske reaksjoner som finner sted på en chip overflate i et gjennomstrømningssystem. Disse målingene kan brukes til å utlede konformasjonsinformasjon om molekylære interaksjoner som finner sted, ettersom molekylstørrelsen (fra lagtykkelsen) og foldetettheten (fra RI) endres. DPI brukes vanligvis til å karakterisere biokjemiske interaksjoner ved å kvantifisere enhver konformasjonsendring samtidig som måling av reaksjonshastigheter, affiniteter og termodynamikk.

Teknikken er kvantitativ og sanntid (10 Hz) med en dimensjonsoppløsning på 0,01 nm.

applikasjoner

En ny applikasjon for dobbeltpolarisasjonsinterferometri dukket opp i 2008, hvor lysintensiteten som passerer gjennom bølgelederen slukkes i nærvær av krystallvekst. Dette har gjort det mulig å overvåke de aller tidligste trinnene i proteinkrystallkjerner. Senere versjoner av dobbeltpolarisasjonsinterferometre har også muligheten til å kvantifisere rekkefølgen og forstyrrelsen i dobbeltbrytende tynne filmer. Dette har for eksempel blitt brukt til å studere dannelsen av lipiddobbelag og deres interaksjon med membranproteiner.

Referanser

Videre lesning