Hemoglobin elektroforese - Hemoglobin electrophoresis
Hemoglobinelektroforese er en blodprøve som kan oppdage forskjellige typer hemoglobin . Testen kan påvise hemoglobin S, form forbundet med sigdcelleanemi , så vel som andre unormale typer av hemoglobin, slik som hemoglobin C . Det kan også brukes til å undersøke thalassemias , som er lidelser forårsaket av mangelfull hemoglobinproduksjon.
Fremgangsmåte
Testen bruker prinsippene for gelelektroforese for å skille ut de forskjellige typer hemoglobin og er en type naturlig gelelektroforese . Etter at prøven har blitt behandlet for å frigjøre hemoglobinet fra de røde blodlegemene, blir den introdusert i en porøs gel (vanligvis laget av agarose eller celluloseacetat ) og utsatt for et elektrisk felt , oftest i et alkalisk medium. Ulike hemoglobiner har forskjellige ladninger, og i henhold til disse ladningene beveger de seg med forskjellige hastigheter i gelen og til slutt danner diskrete bånd (se elektroforetiske migrasjonsmønstre ). En kvalitetskontrollprøve som inneholder hemoglobiner A, F, S og C kjøres sammen med pasientprøven for å hjelpe til med å identifisere de forskjellige båndene. De relative mengdene av hver type hemoglobin kan estimeres ved å måle den optiske tettheten til båndene, selv om denne metoden ikke er pålitelig for hemoglobiner som er tilstede i lave mengder.
Fordi hemoglobiner viser forskjellige migrasjonsmønstre avhengig av pH- nivå, kan testing av den samme prøven ved både en syre og en alkalisk pH bidra til å identifisere unormale hemoglobiner som ellers ville være umulig å skille fra andre.
Klinisk signifikans
Voksent humant blod inneholder normalt tre typer hemoglobin: hemoglobin A , som utgjør omtrent 95% av totalen; hemoglobin A 2 , som utgjør mindre enn 3,5%; og en liten mengde hemoglobin F . Hvis unormale hemoglobinvarianter som hemoglobin S (som forekommer ved sigdcellesykdom ), C eller E er til stede, vil de fremstå som uventede bånd på elektroforese (forutsatt at de ikke migrerer til samme sted som andre hemoglobiner).
Hemoglobinelektroforese kan også brukes til å undersøke thalassemias , som er forårsaket av redusert produksjon av underenheter av hemoglobinmolekylet. Hemoglobin A- 2 nivåer er vanligvis forhøyet i beta-thalassemi moll og hemoglobin F kan noe økt. I beta-thalassemia major er hemoglobin A redusert (eller i noen tilfeller fraværende) og hemoglobin F er markert forhøyet; A 2 nivåer er variable. I hemoglobin H-sykdom , en form for alfa-thalassemia , kan det oppdages et unormalt bånd av hemoglobin H, og noen ganger et bånd av Hemoglobin Barts ; men i det mildere alfa-thalassemia-trekket er resultatene av elektroforese effektivt normale.
Historie
Linus Pauling er kreditert oppfinnelsen av hemoglobinelektroforese i 1949. Nyere alternativer til konvensjonell hemoglobinelektroforese inkluderer isoelektrisk fokusering , kapillær soneelektroforese og høyytende væskekromatografi .