Ziehl – ​​Neelsen flekk - Ziehl–Neelsen stain

Mycobacterium tuberculosis visualisering ved hjelp av Ziehl - Neelsen flekken
Ziehl – ​​Neelsen (syrefast) flekk-diagram over grunnleggende trinn

Ziehl-Neelsen farging er en type syrefast flekk, først introdusert av Paul Ehrlich . Ziehl-Neelsen farging er en bakteriologisk flekk som brukes til å identifisere syrefaste organismer, hovedsakelig Mycobacteria . Den er oppkalt etter to tyske leger som modifiserte flekken: bakteriologen Franz Ziehl (1859–1926) og patologen Friedrich Neelsen (1854–1898).

Mykobakterier

I anatomiske patologiprøver har immunhistokjemi og modifikasjoner av Ziehl-Neelsen-farging (for eksempel Fite-Faraco-metoden ) lignende diagnostisk nytteverdi. Begge er bedre enn tradisjonell farging av Ziehl - Neelsen.

Slekten Mycobacterium er en sakte voksende bakterie, som består av små stenger som er svakt buede eller rette, og regnes som gram -positive. Noen typer Mycobacteria danner grener eller filamenter. Noen mykobakterier er frittlevende saprofytter, men mange er patogener som forårsaker sykdom hos dyr og mennesker. Mycobacterium bovis forårsaker tuberkulose hos storfe. Siden tuberkulose kan spres til mennesker, pasteuriseres melk for å drepe noen av bakteriene. Noen Mycobacteria -arter som forårsaker sykdom hos mennesker inkluderer Mycobacterium leprae , Mycobacterium kansasii , Mycobacterium marinum , Mycobacterium bovis , Mycobacterium africanum og medlemmer av Mycobacterium avium -komplekset. Mycobacterium tuberculosis er en art av Mycobacterium som forårsaker tuberkulose (TB). Mycobacterium tuberculosis er en luftbåren bakterie som vanligvis infiserer menneskelige lunger. Symptomer på tuberkulose inkluderer dårlig hoste, brystsmerter, tretthet, vekttap, ingen appetitt, frysninger, feber og nattesvette. Det typiske opplegget for behandling av en latent TB -infeksjon inkluderer bruk av isoniazid, rifapentin og rifampin. Behandlingen endres for de som har utviklet en medikamentresistent TB -stamme. Tester for TB inkluderer blodprøver, hudtester og røntgenstråler fra brystet. Når man ser på utstrykene for TB, beises det med en syrefast flekk. Disse syrefaste organismer som Mycobacterium inneholder store mengder lipidstoffer i celleveggene som kalles mykolsyrer. Disse syrene motstår farging ved vanlige metoder, for eksempel en Gram -flekk . Det kan også brukes til å flekke noen få andre bakterier, for eksempel Nocardia . Reagensene som brukes til Ziehl – ​​Neelsen -farging er - carbol fuchsin , sur alkohol og metylenblått . Sure raske basiller er lyse røde etter flekker.

Sopp

Ziehl - Neelsen farging er en type smalspektret soppflekk. Smale spekter av sopp er selektive, og de kan bidra til å differensiere og identifisere sopp. Resultatene av Ziehl – ​​Neelsen -farging er varierende fordi mange soppcellevegger ikke er syrefaste. Et eksempel på en vanlig type syrefast sopp som vanligvis er farget med Ziehl – ​​Neelsen-farging, kalles Histoplasma (HP). Histoplasma finnes i jord og avføring fra fugler og flaggermus. Mennesker kan pådra seg histoplasmose ved innånding av soppsporene. Histoplasma kommer inn i kroppen og går til lungene hvor sporene blir til gjær. Gjæren kommer inn i blodstrømmen og påvirker lymfeknuter og andre deler av kroppen. Vanligvis blir folk ikke syke av å puste inn sporer, men hvis de gjør det, har de vanligvis influensalignende symptomer. En annen variant av denne fargemetoden brukes i mykologi for å differensiere flekker syrefaste inkrusjoner i kutikulære hyfer av visse sopparter i slekten Russula . Noen frie endosporer kan forveksles med små gjær, så farging brukes til å identifisere de ukjente soppene. Det er også nyttig i identifiseringen av noen protozoer, nemlig Cryptosporidium og Isospora . Ziehl – ​​Neelsen -flekken kan også hindre diagnosen ved paragonimiasis fordi eggene i sputumprøven for egg og parasitt (O&P) kan oppløses av flekken, og brukes ofte i denne kliniske setting fordi tegn og symptomer på paragonimiasis ligner sterkt. de av TB.

Historie

I 1882 oppdaget Robert Koch etiologien til tuberkulose. Rett etter Kochs oppdagelse utviklet Paul Ehrlich en flekk for mycobacterium tuberculosis, kalt alunhematoksylinflekken. Franz Ziehl endret deretter Ehrlichs fargeteknikk ved å bruke karbolsyre som beitemiddel. Friedrich Neelsen beholdt Ziehls valg av betong, men endret den primære flekken til carbol fuchsin. Ziehl og Neelsens modifikasjoner har sammen utviklet Ziehl - Neelsen flekken. En annen syrefast flekk ble utviklet av Joseph Kinyoun ved å bruke Ziehl-Neelsen fargeteknikk, men fjernet oppvarmingstrinnet fra prosedyren. Denne nye flekken fra Kinyoun fikk navnet Kinyoun -flekken.

Fremgangsmåte

En typisk AFB -flekkprosedyre innebærer å slippe cellene i suspensjon på et lysbilde, deretter lufttørke væsken og varme fikse cellene.

Sammendrag av syrefast flekk (Ziehl – ​​Neelsen flekk)
Bruk av Reagens Cellefarge
Surt raskt Ikke syrefast
Primærfargestoff Carbol fuchsin rød rød
Avfarging Sur alkohol rød Fargeløs
Mot flekk Metylenblått / malakittgrønt rød Blå

Studier har vist at en AFB -flekk uten kultur har en dårlig negativ prediktiv verdi. En AFB -kultur bør utføres sammen med en AFB -flekk; dette har en mye høyere negativ prediktiv verdi.

Mekanisme for syrerask farging i syrefaste celler og ikke-syreraske celler.

Mekanisme forklaring

I utgangspunktet flekker carbol fuchsin hver celle. Når de er farget med syrealkohol, blir det bare syrefrie bakterier som farges av siden de ikke har et tykt, voksaktig lipidlag som syrefaste bakterier. Når motflekk påføres, tar ikke-syreraske bakterier den opp og blir blå (metylenblå) eller grønn (malakittgrønn) når den sees under mikroskopet. Syrefaste bakterier beholder carbol fuchsin slik at de ser røde ut.

Modifikasjoner

Se også

Eksempler på elektroniske protokoller

Referanser

Bibliografi

  • "Mikrobiologi med sykdommer ved kroppssystem", Robert W. Bauman, 2009, Pearson Education, Inc.

Eksterne linker